Il test di fermentazione del mannitolo viene utilizzato per verificare se un microbo può fermentare il carboidrato mannitolo come fonte di carbonio. Se il mannitolo è stato utilizzato dal microbo, saranno prodotti sottoprodotti acidi e il pH del il mezzo in cui si trova il microbo cadrà.
Il mannitolo è anche noto come mannite, zucchero di manna e osmitrolo. È un solido bianco cristallino che ha un aspetto e un sapore come lo zucchero. Il suo nome deriva dalla sua somiglianza con la manna alimentare biblica. La sua formula molecolare è C6H14O6. Nel test di fermentazione del mannitolo, un microbo viene spesso coltivato in piastre di agar sale mannitolo (MSA), che contengono sia mannitolo che sale. In questi luoghi, la maggior parte dei microbi non sarà in grado di crescere a meno che non siano in grado di metabolizzare il mannitolo.