La maggior parte dei pipistrelli usa il sonar sonoro o biologico, noto come ecolocalizzazione, per navigare. I pipistrelli emettono suoni che rimbalzano indietro come un'eco e permettono loro di rilevare gli ostacoli sul loro percorso, individuare i posatoi e trovare cibo.
Ci sono più di 900 specie di pipistrelli, e la maggior parte di loro usa varie caratteristiche fisiche, come orecchie e sonar simili a megafono, come loro principale meccanismo di guida. I pipistrelli usano le loro voci, le loro narici o la loro lingua per emettere suoni ultrasonici nell'intervallo di frequenze tra 20 e 200 kilohertz (Khz). Gli umani non riescono a sentire i suoni dei pipistrelli perché i picchi dell'udito umano a circa 20 Khz. Si tratta di un suono forte che va da 50 a 120 decibel, che sarebbe come un allarme antincendio che si spegne a circa 4 pollici dall'orecchio.
La rivista Scientific American riporta che le chiamate di ecolocalizzazione sono caratterizzate da intensità (livello di decibel), frequenza e quanto tempo durano. La maggior parte dei pipistrelli usa una combinazione di suoni di ecolocalizzazione di bassa e alta frequenza per dire loro la dimensione, l'estensione, la posizione, la velocità e la direzione del volo di una preda. Il cervello e le orecchie di un pipistrello sono estremamente sensibili al cambio di frequenza e possono azzerarsi su un insetto distante un metro in circa sei millisecondi. Si ritiene che le varie dimensioni, forme, pieghe e rughe nelle orecchie dei pipistrelli siano una parte importante della capacità di un pipistrello di rilevare e azzerare la preda.