I leoni, come altri mammiferi, urinano attraverso i loro genitali, attraverso un tubo che porta dalla loro vescica al mondo esterno. Il sistema urinario dei leoni è simile ad altri gatti, in quanto utilizzano l'urina sia per eliminare gli sprechi che per comunicare tramite marcatura a spruzzo.
Tutti i mammiferi hanno la stessa anatomia di base per la minzione. I reni filtrano i rifiuti dal sangue attraverso un complesso sistema di tubuli. Un tubo chiamato uretere trasporta quindi il fluido che è stato processato dai reni nella vescica, dove viene conservato.
Nei leoni e nelle tigri, l'urina immagazzinata nella vescica contiene anche sostanze grasse odorose che aiutano a marcare il territorio. Tutte le specie di gatti si impegnano nella marcatura a spruzzo, una sorta di urinazione in cui il fluido viene spruzzato verso l'esterno allo scopo di reclamare il territorio con segnali di odore. I maschi si dedicano alla marcatura a spruzzo più frequentemente rispetto alle femmine, ma entrambi sanno farlo al raggiungimento dell'età di 2 anni.
Come con altri mammiferi, l'urina del leone passa dalla vescica verso l'esterno attraverso l'uretra, un tubo che attraversa la vulva o il pene.
