L'enzima DNA polimerasi III è l'enzima primario coinvolto nella replicazione batterica del DNA. Esegue la funzione polimerasi 5'-3 ', il che significa che aggiunge nucleotidi all'estremità 3' della formazione Filamento di DNA durante la replicazione.
Prima che possa iniziare la replicazione, l'enzima helicase svolge i due filamenti del DNA. Entrambi i fili diventano modelli per la replica. La DNA polimerasi III non può aggiungere nucleotidi liberi a questi filamenti fino a quando i primer non sono stati aggiunti dall'enzima primasi. Esiste anche una DNA polimerasi I che rilegge i filamenti di DNA appena sintetizzati per assicurarsi che siano stati aggiunti i nucleotidi appropriati. Risolve errori quando vengono rilevati rimuovendo il cattivo nucleotide e aggiungendo quello corretto.