Uno spettrofotometro viene utilizzato per misurare l'intensità della luce, o quantità di fotoni, assorbita da un oggetto campione o la quantità di fotoni riflessi da un oggetto campione. Lo strumento è costituito da uno spettrometro per produrre luce e un fotometro per misurare l'intensità della luce.
Uno spettrofotometro passa un raggio di luce attraverso un oggetto campione e misura l'intensità della luce che raggiunge il rilevatore. Uno spettrofotometro può essere classificato come uno spettrofotometro IR o uno spettrofotometro UV-visibile, a seconda dell'intervallo di lunghezze d'onda della sorgente luminosa.
Il principio base della spettrofotometria è che ogni composto trasmette o assorbe la luce su una lunghezza d'onda specificata. La spettrofotometria è un metodo utile di analisi quantitativa in campi come la biochimica, la fisica e la chimica.