Iene maculate di solito mangiano una dieta ad alto contenuto erbivoro terrestre di grandi dimensioni, in particolare zebre, gazzelle, bufali e gnu. Anche se occasionalmente si comportano da spazzini, le iene maculate sono principalmente cacciatori.
Le iene maculate sono molto adattabili e cacciano quasi tutti gli animali erbivori quando non si trovano fonti alimentari comuni. Abitano in gran parte dell'Africa, quindi la loro dieta cambia con la posizione. Altre prede favorite per le iene includono eland, topi, impala, warthog, springbok, kudu, lepre e alcuni animali domestici o da fattoria. Sono stati anche osservati caccia al rinoceronte e ippopotamo. Queste iene sono spesso in competizione diretta con i leoni, con il risultato che ogni specie ruba o scavina dalla caccia dell'altro. L'unica area conosciuta dove le iene macchiate procurano la maggior parte della loro dieta attraverso lo scavenging è in Zambia.
