L'insediamento di Jamestown nell'odierna Virginia fu il primo accordo con lo statuto concesso alla Compagnia della Virginia da King James I. I coloni della Virginia Company fecero terra sull'isola Jamestown il 14 maggio 1607. L'insediamento crebbe e alla fine tenne la prima assemblea rappresentativa inglese nel Nord America.
Il Capitano Bartolomeo Gosnold guidò i coloni a costruire una colonia sull'isola Jamestown perché era in una posizione in cui le navi spagnole non sarebbero state in grado di attaccare facilmente; tuttavia, gli indiani hanno attaccato l'insediamento entro pochi giorni dall'atterraggio. Dopo essere sopravvissuto all'attacco, la gente ha iniziato a costruire un forte rudimentale.
Nel 1609, il forte subì un'esplosione di polvere da sparo, che ferì il capitano John Smith, l'uomo incaricato di contribuire a fornire l'insediamento con merci dall'Inghilterra. L'insediamento riuscì a malapena a superare l'inverno successivo a causa della mancanza di rifornimenti, incursioni indiane e il clima rigido; solo 60 coloni sopravvissero nella primavera del 1610. A giugno arrivò finalmente una nave dall'Inghilterra, portando con sé nuove provviste e un nuovo governatore, Lord De La Warr.
Inoltre, la colonia era nota per essere stata associata al Pocahontas dei nativi americani e al padre Powhatan. Ha sposato il coltivatore di tabacco John Rolfe nel 1614.
