I testicoli producono sia lo sperma che l'ormone androgeno testosterone, che è un ormone vitale per lo sviluppo maschile, che guida i cambiamenti che avvengono durante la pubertà. Tuttavia, il testosterone non è l'unico ormone che i testicoli producono. I testicoli sintetizzano anche l'ormone anti-Müllerian, il fattore insulino-simile 3 e l'estradiolo.
Oltre alla sua importanza nella pubertà, il testosterone svolge anche un ruolo fondamentale nelle prime fasi dello sviluppo maschile all'interno del feto. Durante la pubertà, l'aumento dei livelli di testosterone innesca i cambiamenti, come un aumento della crescita dei peli facciali, l'approfondimento della voce e la crescita della crescita maschile. Durante la vita di un uomo, il testosterone agisce per stimolare la produzione di sperma.
Il testosterone viene rilasciato dai testicoli dalle cellule di Leydig che si trovano tra le strutture chiamate tubuli seminiferi.