Molti gufi sono predatori apicali, il che significa che gli adulti sani non hanno predatori naturali allo stato selvatico. Alcune specie, come il gufo delle tane, affrontano la predazione da falchi, tassi e volpi. I grandi gufi cornuti adulti non hanno nemici naturali.
I gufi sono caratterizzati da grandi occhi, facce piatte e dischi facciali. Le piume attorno a ciascun disco possono essere manipolate per dirigere il suono nelle cavità dell'orecchio del gufo. Gli occhi altamente sviluppati del gufo sono in grado di vedere in condizioni di scarsa illuminazione. La maggior parte delle specie di gufo sono notturne e utilizzano la furtività per sorprendere e catturare la preda. Il becco acuminato e gli artigli potenti del gufo aiutano a catturare la preda, che è composta principalmente da insetti e roditori.