tRNA interpreta la sequenza nucleotidica dell'mRNA per costruire la sequenza amminoacidica corrispondente. tRNA legge codoni di mRNA per costruire proteine. tRNA fa il suo lavoro dopo che l'mRNA è pronto per la traduzione.
L'mRNA è costituito da stringhe di codoni, che sono insiemi di tre nucleotidi che codificano per un singolo tipo di amminoacido. Lo scopo del tRNA è leggere questi gruppi di tre e tradurre tali informazioni per produrre l'amminoacido corretto. Il tRNA è collegato con i codoni dai ribosomi poiché ciascun codone di amminoacidi ha un trio specifico di nucleotidi. Il ribosoma trova il codone di partenza, AUG, e quindi viene prodotto il tRNA corretto. Il tRNA produce l'amminoacido e quindi viene scartato, ma l'amminoacido rimane indietro. L'amminoacido si lega con il prossimo nella catena, che poi si lega con il prossimo e così via. Questa serie di aminoacidi crea una proteina.
Questo processo continua fino a quando il ribosoma non trova uno dei codoni di stop, come UGA, e il ribosoma si allontana quindi dall'mRNA e finisce la proteina. Di solito ci sono più ribosomi e gruppi di tRNA che lavorano sullo stesso filone di mRNA per produrre proteine.