La differenza tra ELISA diretto e indiretto è che l'ELISA indiretto richiede l'aggiunta di un anticorpo secondario, mentre l'ELISA diretto utilizza solo un anticorpo primario. L'ELISA indiretto è considerato più sensibile quando rileva le sostanze, ma l'ELISA diretto è un processo più rapido ed economico che richiede meno passaggi.
L'ELISA diretto, o saggio di immunoassorbimento enzimatico, inizia con l'assorbimento di un antigene su una piastra. Viene quindi aggiunta una proteina per bloccare tutti gli altri siti di legame possibili. Il primo anticorpo viene aggiunto e si lega a qualsiasi epitopo dell'antigene riconosciuto. L'ELISA indiretto continua il processo aggiungendo un secondo anticorpo, che si lega al primo anticorpo. Il primo anticorpo è disponibile solo se è legato all'antigene.
Entrambi i processi richiedono numerosi lavaggi in laboratorio per rimuovere sostanze aggiuntive. Il processo ELISA è importante in laboratorio perché consente agli scienziati di identificare gli antigeni. È un modo popolare e affidabile per testare le malattie e gli allergeni alimentari.
L'ELISA indiretto è in grado di rilevare quantità minori di un antigene e consente di utilizzare un singolo anticorpo secondario con una pletora di anticorpi primari diversi. L'ELISA diretto richiede quantità di antigene più elevate per effettuare un rilevamento e non è così flessibile, perché viene utilizzato un solo anticorpo.
