Quando si preparano i batteri per l'osservazione con un microscopio, il calore che fissa lo striscio sul vetrino uccide i batteri per fermare la potenziale diffusione della malattia e aderisce allo striscio sul vetrino. Dopo il fissaggio del calore, lo striscio è macchiato.
Secondo il dipartimento di microbiologia dell'Università del Wisconsin-Madison, la preparazione del vetrino inizia con un campione di batteri mescolato con un po 'di acqua distillata. Il campione è steso sottile sul vetrino e lasciato asciugare all'aria. Successivamente la diapositiva viene fissata mediante calore passando la parte inferiore attraverso la fiamma di un becco Bunsen alcune volte. Dopo il corretto fissaggio del calore, il vetrino è caldo ma non troppo caldo. Quando la diapositiva si è raffreddata, la macchia viene applicata.