Uno dei fattori che influisce sull'attività enzimatica è il pH. Se ci sono piccoli cambiamenti nel pH, l'enzima denaturerà e l'attività catalitica andrà persa.
Un altro fattore è la temperatura. Le reazioni catalizzate da enzimi aumenteranno la velocità all'aumentare della temperatura. Poiché gli enzimi sono proteine, diventeranno denaturati e diventeranno inattivi alle temperature più alte.
Anche la concentrazione dell'enzima influisce sull'attività. Se la concentrazione dell'enzima viene aumentata mentre la concentrazione del substrato viene mantenuta costante, la velocità della reazione raddoppierà quando la concentrazione dell'enzima raddoppia. Ciò è dovuto al fatto che la concentrazione molare dell'enzima utilizzato quasi sempre sarà inferiore alla concentrazione molare del substrato.
