Gli irochesi credevano in più divinità, il più importante era il creatore di esseri umani, piante, animali e il bene nel mondo, noto come Grande Spirito. Sebbene non credessero che gli umani potessero comunicare direttamente con questi spiriti, credevano che fosse possibile bruciando il tabacco.
Gli irochesi avevano grande riverenza per i loro sogni, e interpretavano e cercavano segni in loro. Non avevano preti o sciamani a tempo pieno, ma preferivano specialisti maschili e femminili part-time per condurre cerimonie religiose.
Gli irochesi fabbricarono "False Face Masks", che erano facce intagliate su alberi in piedi e poi tagliate, decorate e indossate in seguito. Queste maschere rappresentavano gli spiriti che apparivano all'intagliatore nella cerimonia del tabacco eseguita in anticipo.
Gli uomini della tribù cacciarono e pescarono, costruirono case, ripulirono campi per piantare, commerciarono con estranei e presero parte a qualsiasi guerra. Le donne coltivavano, allevavano bambini, preparavano i pasti e producevano cestini e altri utensili.
Molte parti della cultura irochese riguardavano aspetti matrilineari. Sebbene le persone si sposassero e divorziassero e gli uomini avessero spesso più mogli, dopo il divorzio i bambini rimasero con la madre. Anche l'ereditarietà ha seguito questo modello, con proprietà che vanno alle donne.
Gli Irochesi non praticavano riti di passaggio formalizzati noti, se non per coloro che prendevano posizione politica.
