Se utilizzati in cucina, le differenze di sapore tra l'olio di tartufo bianco e nero sono estremamente sottili. Così, l'olio di tartufo bianco e nero può essere usato in modo intercambiabile. Il sapore intenso e l'aroma dell'olio di tartufo sono creati dall'uso di composti chimici che imitano quelli trovati nei veri tartufi. L'olio di tartufo viene spesso prodotto combinando un gas aromatico noto come 2,4-dithiapentane con olio d'oliva o olio di girasole.
Ci sono alcune differenze di sapore tra il vero tartufo bianco e nero come scavato nel terreno. I tartufi neri hanno un sapore terroso e un aroma pungente, mentre i tartufi bianchi hanno un profumo muschiato con un sapore che ha un accenno di aglio e scalogno. Poiché i tartufi freschi sono costosi e scarsi, l'olio di tartufo viene utilizzato come sostituto in molti piatti. Le sostanze chimiche artificiali come il 2,4-dithiapentane replicano i gas naturali prodotti dai veri tartufi. Alcune persone non amano la natura artificiale dell'olio di tartufo commerciale e notano che i tartufi naturali producono fino a 30 diversi gas, una complessità di aromi che è difficile da duplicare sinteticamente.
L'olio al tartufo viene normalmente applicato al cibo prima di essere servito. Bastano poche gocce per migliorare il sapore dei piatti. Mentre alcuni oli di tartufo contengono pezzi di tartufo essiccato, questi di solito non contribuiscono al sapore dell'olio.
